霉菌酵母菌測(cè)試片  1、原理及適用范圍
    
     霉菌和酵母菌廣泛存在于空氣、水和土壤中，絕大部分對(duì)人體無(wú)害，但有些霉菌對(duì)人體有害，比如說(shuō)黃曲霉，它分泌的黃曲霉毒素是一種強(qiáng)致癌物。霉菌還可引起食物霉變，會(huì)刺激人體消化道、胃部等，嚴(yán)重的還可損傷肝臟，造成食物中毒。霉菌酵母菌測(cè)試片（FilmplateTM Enumeration of moulds and yeasts BM207）由營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基、吸水凝膠和酶顯色劑等組成。與傳統(tǒng)方法相比，省去了配制培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作，隨時(shí)可以開始進(jìn)行抽樣檢測(cè)，而且操作簡(jiǎn)便，通過(guò)酶顯色劑的放大作用，使菌落提前清晰地顯現(xiàn)出來(lái)，培養(yǎng)時(shí)間由一周縮短為72h。本品可用于各類食品（如糕點(diǎn)、餅干等）中霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)，非常適合于食品衛(wèi)生檢驗(yàn)部門和食品生產(chǎn)企業(yè)使用。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)霉菌和酵母計(jì)數(shù)（GB/T 4789.2010）。
    
    2、操作方法
     2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL無(wú)菌水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，振搖30min，制成1:10的樣品勻液，用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL無(wú)菌水的試管內(nèi)，反復(fù)吸吹50次成為1:100的樣品勻液，以此類推，做出1:1000等稀釋度的樣品勻液，每次換一支吸管。
     2.2、接種：一般食品選2～3個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè)，含菌量少的液體樣品（如飲用純水和礦泉水等）可直接吸取原液進(jìn)行檢測(cè)。將置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，揭開上層膜，用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固。每個(gè)稀釋度接種兩片，同時(shí)用無(wú)菌水做空白陰性對(duì)照。
     2.3、培養(yǎng)：將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為28℃±1℃，培養(yǎng)48～72h。
    
    3、結(jié)果判讀
     霉菌和酵母菌在測(cè)試片上生長(zhǎng)后會(huì)顯示藍(lán)色斑點(diǎn)，霉菌菌落顯示的斑點(diǎn)略大呈放射狀，酵母菌落則較小而圓滑，許多霉菌在培養(yǎng)后期會(huì)呈現(xiàn)其本身*的顏色。選擇菌落數(shù)在10CFU～150CFU的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)算兩個(gè)測(cè)試片的平均值乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升（克）樣品中霉菌和酵母菌的數(shù)目。
    
    4、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式
     4.1計(jì)數(shù)
     4.1.1 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于150CFU，則對(duì)稀釋度zui高的測(cè)試片進(jìn)行計(jì)數(shù)，按平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見(jiàn)例1）。
     4.1.2 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于10CFU，則應(yīng)按稀釋度zui低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見(jiàn)例2）。
     4.1.3 若所有的稀釋度（包括液體樣品原液）均無(wú)菌落生長(zhǎng)，則以小于1乘以zui低稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見(jiàn)例3）。
     4.2報(bào)告
     4.2.1 菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí)，按“四舍五入”原則修約，采用兩位有效數(shù)字報(bào)告。
     4.2.2 菌落數(shù)大于或等于100時(shí)，前三位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后，取前兩位數(shù)字，后面用0代替位數(shù)，也可用10的指數(shù)形式來(lái)表示，按“四舍五入”原則修約后，采用兩位有效數(shù)字。
     4.2.3 稱重取樣以CFU/g為單位報(bào)告，體積取樣以CFU/mL為單位報(bào)告。
    
    
    
    例次 稀釋度及菌落數(shù) 選定計(jì)數(shù)
    稀釋度 報(bào)告方式
    （CFU/g或CFU/mL）
    10-1 10-2 10-3
    1
    2
    3 多不可計(jì)
    8
    0 352
    5
    0 169
    1
    0 10-3
    10-1
    ＜1×10 3.0×10 5
    8.0×10
    ＜1×10
    
    5、附加說(shuō)明
     由于霉菌常以孢子的形式在空氣中到處傳播，而多種樣品是要求霉菌酵母菌不得檢出，因此檢測(cè)霉菌時(shí)需特別小心操作，取樣用品、稀釋用水和吸管吸頭等都需仔細(xì)消毒，接種時(shí)盡量避免空氣流動(dòng)，動(dòng)作要干凈利落，每次用無(wú)菌水接兩片空白對(duì)照，以免出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。
    
    6、保存條件
     本產(chǎn)品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質(zhì)期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個(gè)月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水，在拆封前將整包回溫至室溫。 
    
：李菲     :