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EZ DNA甲基化試劑盒(200次)

參考價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 公司名稱北京中西泰安技術服務有限公司
  • 品       牌
  • 型       號型號:BTT3-
  • 所  在  地北京市
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 更新時間2019/7/11 11:43:49
  • 訪問次數(shù)418
產(chǎn)品標簽:

EZ DNA甲基化試劑盒(200次

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中西集團成立于1988年,是一家集貿(mào)易、生產(chǎn)制造、系統(tǒng)集成、工程咨詢和維修服務的企業(yè);在國內(nèi)設有多個辦事處和合資公司。 中西集團是高科技產(chǎn)品系統(tǒng)集成商。它大量引進國外各種*的在線、離線儀器儀表、機械設備與材料,為各行業(yè)用戶提供了大量的產(chǎn)品和服務,尤其在石油、化工、環(huán)保、電子、冶金、機械、光學、通訊、科技教學、醫(yī)療衛(wèi)生等領域,與世界眾多*專業(yè)廠家有密切合作關系。同時,公司充分利用互聯(lián)網(wǎng)絡的優(yōu)勢,不僅能為用戶提供Z廣泛的產(chǎn)品選擇機會,獲得*的性格比,還可以為用戶快捷提供科技信息。與此同時,我公司還向廣大用戶*使用國產(chǎn)價格適中、性能可靠、使用穩(wěn)定,符合國家質(zhì)量標準的儀器、儀表和設備,目前我公司與許多國內(nèi)優(yōu)秀儀器儀表制造廠商定有代理協(xié)議。 中西集團自成立辦事處及合資公司以來,公司全體員工努力遵循產(chǎn)品市場銷售與完善售后服務同步的原則,在激烈的市場競爭中顯示出強大競爭力,業(yè)務蓬勃發(fā)展,并為新疆油田、大慶油田、燕山石化、上海高橋、北京環(huán)保、上海環(huán)保、天津環(huán)保、首鋼、寶鋼、清華、北大、中科院等眾多新老客戶提供了許多*產(chǎn)品和優(yōu)質(zhì)服務。 中西集團由高素質(zhì)的老、中、青精干人員組成,有具有豐富工作經(jīng)驗的老同志;有在生產(chǎn)*線實踐磨練出來的中年工程師;有畢業(yè)于國內(nèi)大學,獲學士、碩士、博士學位,已經(jīng)過幾年鍛煉的中堅力量;還有剛剛走出校門,充滿理想和朝氣的青年。 繼往開來,中西稟承“追求*、盡善盡美”的一貫宗旨,與您共創(chuàng)輝煌的明天。

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EZ DNA甲基化試劑盒(200次) 型號:BTT3-D5005/美國 貨號:
在 3 小時內(nèi)*轉(zhuǎn)化富含 GC的 DNA.
兩次加熱變性的反應步驟簡化了由未甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)化為*的過程 .
沒有DNA 沉淀.并且通過柱層析一步完成DNA的純化和脫硫.
洗脫的超純 DNA 對于一系列的分子生物分析是非常理想的。

描述
EZ DNA Methylation-Gold KitTM 是我們 EZ DNA Methylation Kit產(chǎn)品的改進版. EZ DNA Methyl
EZ DNA甲基化試劑盒(200次) 產(chǎn)品信息

EZ DNA甲基化試劑盒(200次) 型號:BTT3-D5005/美國 貨號:
在 3 小時內(nèi)*轉(zhuǎn)化富含 GC的 DNA.
兩次加熱變性的反應步驟簡化了由未甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)化為*的過程 .
沒有DNA 沉淀.并且通過柱層析一步完成DNA的純化和脫硫.
洗脫的超純 DNA 對于一系列的分子生物分析是非常理想的。

描述
EZ DNA Methylation-Gold KitTM 是我們 EZ DNA Methylation Kit產(chǎn)品的改進版. EZ DNA Methylation-Gold Kit 將 DNA 變性過程和亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)變過程轉(zhuǎn)化為一步.此步驟采用溫度變性來取代以前方案中使用氫氧化鈉的化學變性過程. 經(jīng)過DNA亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)變,試劑盒可大量回收到 DNA .兩種試劑盒都是基于在胞嘧啶與亞硫酸氫鈉之間發(fā)生的使胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)?的三步反應. EZ DNA Methylation-Gold 與 EZ DNA Methylation Kits 都采用創(chuàng)新的柱內(nèi)脫磺酸技術來減少不必要的DNA沉淀步驟以便每次都可以提供給研究人員較好的結果.試劑盒的設計可以減少模版降解和純化過程中的DNA損失, 并且*轉(zhuǎn)化未甲基化的胞嘧啶.回收的DNA對于PCR擴增、限制性內(nèi)切酶消化、測序、微陣列等下游分析是很理想的. 右圖是 EZ DNA Methylation-Gold Kit所呈現(xiàn)出的結果.

在經(jīng)過亞硫酸氫鹽處理后的DNA 測序結果. 使用EZ DNA Methylation-Gold Kit處理的甲基化的CmpG (在 #5核苷酸位點)DNA.回收的DNA通過PCR來擴增并且直接測序.在 #5位置上甲基化的胞嘧啶仍然保持完整,當未被甲基化的胞嘧啶 (i.e., positions #7, 9, 11, 14 and 15)通過亞硫酸氫鹽處理完后全部轉(zhuǎn)化為*.



試劑制備

CT Conversion Reagent的制備 試劑盒中所提供的CT Conversion Reagent是固體混合物并且一定要在*使用前制備好. 通過添加 900 μl 水, 50 μl 的 M-Dissolving Buffer, 和 300 μl 的 M-Dilution Buffer 到一管的CT Conversion Reagent中. 在室溫下溶解并且震蕩10分鐘或在搖床上搖動10分鐘. 如果看到?jīng)]有溶解的試劑是很正常的, 因為在溶液中的 CT Conversion Reagent 已經(jīng)達到飽和狀態(tài).在使用之前將 CT Conversion Reagent 溶液在室溫 (20°C -30°C)下避光保存.每管的 CT Conversion Reagent 是針對10次 DNA 處理設計的.為了得到較好的結果, CT Conversion Reagent 應當在制備后立即使用.如果不立刻使用的話, CT Conversion Reagent 溶液可以在-20°C存儲1星期.而且在使用之前存儲的 CT Conversion Reagent 溶液一定要在室溫下解凍并且通過震動或顛倒2分鐘來混合. CT Conversion Reagent 對光很敏感,所以要盡量減少在光下的暴露.

M-WASH BUFFER的制備 添加24ml (對于200次的D5006應為96ml) *的乙醇到M-WASH BUFFER中來制備zui終可以使用的M-WASH BUFFER



Protocol
每次制備的DNA 范圍在 500 pg 到 2 μg之間. *量為200-500 ng.

在PCR管中添加 130 μl 的 CT Conversion Reagent 到每 20 μl DNA 樣品中. 如果 DNA 樣品的體積小于 20 μl, 則用水來彌補差量. 通過輕彈試管或移液器操作來混合樣品.
For Example: 4 μl DNA 樣品, 加入16 μl 水, 130 μl CT Conversion Reagent
Note: 對于 DNA 體積 >20 μl, 就要調(diào)整 CT Conversion Reagent的制備過程. 對于每增加 10 μl DNA樣品體積來說,水的量就要隨之減少 100 μl. 例如, 40 μl DNA 樣品, 就要添加 700 μl來制備 CT Conversion Reagent. DNA 樣品的zui大體積為每次轉(zhuǎn)化反應50 μl. 不要調(diào)整 M-Dissolving Buffer 或 M-Dilution Buffer的體積.

將樣品管放到循環(huán)變溫器并按以下步驟操作:

1. 98°C 放置 10 分鐘
2. 64°C放置2.5 小時
3. 立刻進行下述操作或者在4°C 下存儲(zui多20小時).

添加 600 μl 的 M-Binding Buffer 到 Zymo-Spin IC Column 中,并將柱放如試劑盒所提供的Collection Tube中.

裝填樣品 (從步驟 2)到 Zymo-Spin IC? Column 含有 M-Binding Buffer. 蓋上蓋將柱顛倒數(shù)次來混合樣品.

全速 (>10,000 x g)離心 30 秒. 去除流出液.

添加 200 μl 的 M-Wash Buffer 到柱中. 全速離心30 秒.

添加 200 μl 的 M-Desulphonation Buffer 到柱中并且在室溫 (20 °C- 30 °C) 下放置 15-20 分鐘. 在培養(yǎng)后, 全速離心 30 秒.

添加 200 μl 的 M-Wash Buffer 到柱中. 全速離心30 秒. 再添加 200 μl 的 M-Wash Buffer 并且離心 30 秒.

直接添加 10 μl 的 M-Elution Buffer 到柱基質(zhì)中. 將柱放置在 1.5 ml 的管中. 全速離心來洗脫 DNA.

DNA 可立刻進行分析或儲存在低于-20°C 下以備以后使用. 我們建議您對于每次PCR使用 2 - 4 μl洗脫的 DNA.

 

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