農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法與步驟

檢測(cè)方法：酶抑制法

依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)：國(guó)標(biāo)GB/T 5009.199-2003

檢測(cè)儀器：RS-PR-24農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀

  試劑配置

準(zhǔn)備：純凈水/蒸餾水（不能用礦泉水/山泉水）、緩沖液。

顯色劑：加11毫升緩沖液，粉末溶解、混勻即可。

底物：加11毫升純凈水，粉末溶解、混勻即可。

酶：不用另配，可直接使用。

  樣品前處理

1.所有備檢樣品在檢測(cè)前無(wú)需進(jìn)行水洗，否則影響數(shù)據(jù)準(zhǔn)確度。

2.葉菜類(lèi)：至少取不同株上的5片葉片疊加，剪成1cm見(jiàn)方秤取2g，加10ml提取液。

3.顏色深葉菜類(lèi)：對(duì)一些葉綠素較高的蔬菜，也可采取整株蔬菜浸提方法，減少色素干擾。

4.非菜葉類(lèi)：取果實(shí)的表皮，至少4克。用刀從上而下沿表面，削取一片，為增加檢測(cè)代表性，從不同的3個(gè)果實(shí)上削取一片，剪成1cm²大小，稱(chēng)取4g。

5.豆類(lèi)：用刀切片，其中毛豆去殼后檢測(cè)，在浸泡中會(huì)有部分白色外皮浸出，檢測(cè)液需進(jìn)過(guò)濾。

6.水果類(lèi)：如葡萄、提子、楊梅，整顆提取，取1顆，加提取液10ml，震蕩提取5分鐘，中間將樣品用玻璃棒轉(zhuǎn)位置，使樣品各表面充分接觸提取液。提取后取2.5ml上清液，再按正常步驟檢測(cè)。

 特殊樣品前處理

部分樣品，如蔥，蒜，蘿卜，韭菜，芹菜，香菜，以及番茄汁液中含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽(yáng)性，處理這類(lèi)樣品的時(shí)候，可采取整株處理蔬菜浸泡或淋洗。

 操作步驟

 結(jié)果判定

1.△Ac值一定要＞0.3，否則計(jì)算出來(lái)的樣品抑制率是錯(cuò)誤的，這種情況請(qǐng)重做實(shí)驗(yàn)。

（Ac值＜0.3的原因：1、操作問(wèn)題，加樣量不準(zhǔn)確 2、酶溫度太低，或酶失去活性）

2.根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.199-2003要求，當(dāng)蔬菜樣品提取液對(duì)酶的抑制率≥50%時(shí)，表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥存在，樣品為陽(yáng)性結(jié)果。陽(yáng)性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn)2次以上，確保不是操作問(wèn)題而導(dǎo)致的假陽(yáng)性。如有必要，可用氣相色譜等方法作進(jìn)一步確認(rèn)。

3.陽(yáng)性樣品復(fù)檢，在添加樣品名稱(chēng)時(shí)，需把樣品編號(hào)改成初檢編號(hào)，初檢編號(hào)可在“查詢(xún)”中查看。 

4.如需打印數(shù)據(jù)，請(qǐng)?jiān)谵r(nóng)殘儀頁(yè)面未清空時(shí)打印。頁(yè)面清空后無(wú)法打印之前的數(shù)據(jù)?？稍?ldquo;查詢(xún)”，看數(shù)據(jù)是否已上傳。

5.如果需要重新做實(shí)驗(yàn)：清空->關(guān)上蓋子->不放入比色皿，按“通道初始化”

如果需要添加菜名：設(shè)置->樣品名稱(chēng)->添加

如果需要修改服務(wù)器：設(shè)置->數(shù)據(jù)中心->更改->確定

  檢測(cè)結(jié)果處理

1.陰性結(jié)果：結(jié)果為陰性時(shí)，可直接上傳至系統(tǒng)；

2.陽(yáng)性結(jié)果：結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)，檢測(cè)樣品復(fù)檢多一次，如復(fù)檢結(jié)果為陰性，則可直接上傳數(shù)據(jù)；如復(fù)檢結(jié)果還是為陽(yáng)性時(shí)，則數(shù)據(jù)上傳后，檢測(cè)樣品做退換貨處理，并做好退換貨記錄備查。

  注意事項(xiàng)

1.平時(shí)試劑需要放在2~8℃保存，緩沖液可直接放在室溫保存，配制好的試劑在使用前，要先恢復(fù)到室溫，否則會(huì)影響結(jié)果的準(zhǔn)確性，試劑使用前請(qǐng)搖勻。

2.比色皿為易碎材質(zhì)，需要小心保管，同時(shí)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，請(qǐng)勿碰觸比色皿的光滑面，以免影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。

3.試劑避免交叉污染，取出后的試劑不可再打回瓶?jī)?nèi)。

4.酶配制后經(jīng)常用10天內(nèi)用不完的，建議分裝為兩瓶保存，以避免酶因反復(fù)解凍而降低其活性。

5.每加一次試劑，移液器的槍頭都必須更換，避免試劑污染。

6.處理色素含量較高的果蔬樣品，應(yīng)采取整株（體）浸提，盡量避免過(guò)多色素浸出，干擾測(cè)定。若實(shí)驗(yàn)室有條件，對(duì)色素干擾嚴(yán)重的過(guò)濾液,可用活性碳脫色處理.過(guò)濾或離心后，取清液作為待測(cè)液。

7.蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。處理這類(lèi)樣品時(shí)，可采取整株浸提，避免次生物質(zhì)干擾。

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