浙江大學(xué)生物醫(yī)學(xué)院
組織細胞培養(yǎng)技術(shù)研究的對象不一般,它是具有完整生命力的生物單位,因此與其他一般實驗工作不同,要求保持無菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。本文將主要針對細胞培養(yǎng)實驗室,講解建設(shè)使用注意事項。
一、基礎(chǔ)建設(shè)方案之墻頂?shù)?/span>
(1)墻體
廢物暫存間、強電間、水處理間可采用乳膠漆墻面,其他實驗室區(qū)域采用玻鎂板墻體。玻鎂板是氧化鎂、氯化鎂、和水三元體系,具有防火防水、無味無毒、高強質(zhì)輕、施工方便、使用壽命長等特點。
(2)天花
防火等級達到*:天花選用彩鋼板。實用美觀,且易清潔消毒、光滑防水。
防火等級達到B1級:天花選用鋁扣板??纱蠓冉档屯L和機電施工及維修的難度和強度,也利于日后的正常維護和檢修。
(3)地面
地面材料的選擇通常要求抗靜電、抗菌耐磨、耐腐蝕、防火、防塵、降噪音等,色澤選擇和墻體統(tǒng)一或相似的2.2mm厚進口品牌PVC卷材,防火等級為B級以上。
細胞培養(yǎng)實驗室應(yīng)能進行六方面的工作:
無菌操作、孵育、制備、清洗、消毒滅菌處理、儲藏。
無菌操作區(qū)——
理想的無菌操作室應(yīng)劃為三部分:
●更衣室:供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
●緩沖間:位于更衣間與操作間之間。
目的是為了保證操作間的無菌環(huán)境,同時可放置恒溫培養(yǎng)箱及某些必需的小型儀器。
37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱
(37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱)
●無菌操作間:于無菌操作、細胞培養(yǎng)。
大小要適當,且其頂部不宜過高(不超過2.5m),以保證紫外線的有效滅菌效果;
墻壁光滑*以便清潔和消毒;
工作臺安置不應(yīng)靠墻壁,臺面要光滑壓塑作表面,漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀察。
孵育區(qū)——本區(qū)對無菌的要求雖不比無菌區(qū)嚴格,但仍需清潔無塵,因此也應(yīng)設(shè)置在干擾少而非來往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進行,后者費用高,一般實驗室多采用孵箱進行工作。
儲藏區(qū)——主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等,環(huán)境需要清潔無塵。
制備區(qū)——主要進行培養(yǎng)液及有關(guān)培養(yǎng)用的液體等的制備。
清洗和消毒滅菌區(qū)——清潔和消毒滅菌區(qū)應(yīng)與其他區(qū)域分開,主要進行所有細胞培養(yǎng)器皿的清洗、準備、消毒及三蒸水制備等工作。
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