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技術(shù)文章

按用途及微生物種類不同劃分發(fā)酵培養(yǎng)基

閱讀:345          發(fā)布時(shí)間:2022-11-18

按用途不同劃分發(fā)酵培養(yǎng)基

培養(yǎng)基在實(shí)驗(yàn)室和發(fā)酵生產(chǎn)中按其用途可以有不同的分類方法。


1.實(shí)驗(yàn)室常用培養(yǎng)基

(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基

不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求各不相同,但大多數(shù)微生物所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)致?;A(chǔ)培養(yǎng)基就是含有般微生物生長(zhǎng)繁殖所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,廣泛用于細(xì)菌的增菌、檢驗(yàn)中。

(2)加富培養(yǎng)基

加富培養(yǎng)基也稱營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,即在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)制成的類營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基,這些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括血液、血清、酵母浸膏、動(dòng)植物組織液等。加富培養(yǎng)基般用來(lái)培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)型微生物,如培養(yǎng)百日咳博德氏菌(Bordetella pertussis)需要含有血液的加富培養(yǎng)基。加富培養(yǎng)基還可以用來(lái)富集和分離某種微生物,這是因?yàn)榧痈慌囵B(yǎng)基含有某種微生物所需的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),該種微生物在這種培養(yǎng)基中較其他微生物生長(zhǎng)速率快,并逐漸富集而占優(yōu)勢(shì),逐步淘汰其他微生物,從而容易達(dá)到分離該種微生物的目的。

(3)鑒別培養(yǎng)基

鑒別培養(yǎng)基是用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基中加入某種特殊化學(xué)物質(zhì),某種微生物在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)后能產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物,而這種代謝產(chǎn)物可以與培養(yǎng)基中的特殊化學(xué)物質(zhì)發(fā)生特定的化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生明顯的特征性變化,根據(jù)這種特征性變化,可將該種微生物與其他微生物區(qū)分井來(lái)。鑒別培養(yǎng)基主要用于微生物的快速分類鑒定,以及分離和篩選產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物的微生物菌種。

培養(yǎng)基名稱加入化學(xué)物質(zhì)微生物代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基特征性變化主要用途酪素培養(yǎng)基酪素胞外蛋白酶蛋白水解圈鑒別產(chǎn)蛋白酶菌株明膠培養(yǎng)基明膠胞外蛋白酶明膠液化鑒別產(chǎn)蛋白酶菌株油脂培養(yǎng)基(4)選擇培養(yǎng)基

選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某些物理、化學(xué)因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,用來(lái)將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來(lái),具有使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌的功能,廣泛用于菌種篩選等域。

混合菌樣中數(shù)量很少的某種微生物,如直接采用平板劃線或稀釋法進(jìn)行分離,往往因?yàn)閿?shù)量少而無(wú)法獲得。選擇性培養(yǎng)的方法主要有兩種:種是依據(jù)某些微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)需求設(shè)計(jì)選擇培養(yǎng)基。例如,缺乏氮源的選擇培養(yǎng)基可用來(lái)分離固氮微生物;利用以蛋白質(zhì)作為氮源的選擇培養(yǎng)基,可以從混雜的培養(yǎng)基中分離出產(chǎn)胞外蛋白酶的微生物。另種是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),這種化學(xué)物質(zhì)可以抑制或殺死其他微生物,而對(duì)所需分離的微生物無(wú)害。例如,分離放線菌時(shí),在培養(yǎng)基中加入數(shù)滴10%的,可以抑制霉菌和細(xì)菌的生長(zhǎng);在分離酵母菌和霉菌的培養(yǎng)基中,添加、四環(huán)素和等抗生素可以抑制細(xì)菌和放線菌的生長(zhǎng);在篩選含有重組質(zhì)粒的基因工程菌株過(guò)程中,利用質(zhì)粒上具有的對(duì)某種(些)抗生素的抗性選擇標(biāo)記,在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)抗生素,就能比較方便地淘汰非重組菌株,以減少篩選目標(biāo)菌株的工作量。

選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的功能往往結(jié)合在同種培養(yǎng)基中。例如上述EMB培養(yǎng)基既有鑒別不同腸道菌的作用,又有抑制G+菌和選擇性培養(yǎng)G-菌的作用。

2.發(fā)酵生產(chǎn)常用培養(yǎng)基

(1)孢子培養(yǎng)基

孢子培養(yǎng)基是供菌種繁殖、形成孢子的種常用固體培養(yǎng)基。對(duì)這種培養(yǎng)基的要求是能使菌體迅速生長(zhǎng),產(chǎn)生較多優(yōu)質(zhì)的孢子,并要求這種培養(yǎng)基不易引起菌種變異。因此,孢子培養(yǎng)基的基本配制要求有:,營(yíng)養(yǎng)不要太豐富(特別是有機(jī)氮源),否則不易產(chǎn)孢子。如灰色鏈霉菌在葡萄糖硝酸鹽其他鹽類的培養(yǎng)基上都能很好地生長(zhǎng)和產(chǎn)孢子,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,就只長(zhǎng)菌絲而不長(zhǎng)孢子;二,所用無(wú)機(jī)鹽的濃度要適量,不然也會(huì)影響孢子量和孢子顏色;第三,要注意孢子培養(yǎng)基的ph和濕度。生產(chǎn)上常用的孢子培養(yǎng)基有麩皮培養(yǎng)基,小米培養(yǎng)基,大米培養(yǎng)基,玉米碎屑培養(yǎng)基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉高和食鹽等配制成的瓊脂斜面培養(yǎng)基。大米和小米常用作霉菌產(chǎn)孢子培養(yǎng)基,因?yàn)樗鼈兒绷可?,疏松,表面積大,所以是較好的孢子培養(yǎng)基。大米培養(yǎng)基的水分需控制在21%~50%,而曲房空氣濕度需控制在90%~。

(2)種子培養(yǎng)基

種子培養(yǎng)基是供孢子發(fā)芽、生長(zhǎng)和大量繁殖菌絲體,并使菌體長(zhǎng)得粗壯、成為活力強(qiáng)的“種子"的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。因此,種子培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分要求比較豐富和,氮源和維生素的含量也要高些,但總濃度以略稀為好,這樣可有較高的溶解氧,供大量菌體生長(zhǎng)繁殖。種子培養(yǎng)基在微生物代謝過(guò)程中能維持穩(wěn)定的ph,其組成還要根據(jù)不同菌種的生理特征而定。般種子培養(yǎng)基都用營(yíng)養(yǎng)豐富而的天然有機(jī)氮源,因?yàn)橛行┌被崮艽碳ゆ咦影l(fā)芽,但無(wú)機(jī)氮源容易較快被利用,有利于菌體迅速生長(zhǎng),所以在種子培養(yǎng)基中常包括有機(jī)及無(wú)機(jī)氮源。后的種子培養(yǎng)基的成分好能較接近發(fā)酵培養(yǎng)基,這樣可使種子進(jìn)入發(fā)酵培養(yǎng)基后能迅速適應(yīng),快速生長(zhǎng)。

(3)發(fā)酵培養(yǎng)基

發(fā)酵培養(yǎng)基是供菌種生長(zhǎng)、繁殖和合成產(chǎn)物之用。它既要使種子接種后能迅速生長(zhǎng),達(dá)到定的菌絲濃度,又要使長(zhǎng)好的菌體能迅速合成所需產(chǎn)物。因此,發(fā)酵培養(yǎng)基的組成除有菌體生長(zhǎng)所必需的元素外,還要有合成產(chǎn)物所需的特定元素、前體和促進(jìn)劑等。當(dāng)菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成所需要的總的碳源、氮源、磷源等的濃度過(guò)高,或生長(zhǎng)和合成兩階段各需的佳條件要求不同時(shí),可考慮用分批補(bǔ)料的方式來(lái)加以滿足。


按微生物種類不同劃分培養(yǎng)基根據(jù)微生物的種類不同可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基和霉菌培養(yǎng)基等。

常用的異養(yǎng)型細(xì)菌培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基;常用的自養(yǎng)型細(xì)菌培養(yǎng)基是無(wú)機(jī)的合成培養(yǎng)基;常用的放線菌培養(yǎng)基為高氏號(hào)合成培養(yǎng)基;常用的酵母菌培養(yǎng)基為麥芽汁培養(yǎng)基;常用的霉菌培養(yǎng)基為察氏合成培養(yǎng)基和馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。




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